피부시험은 기능성 원료를 확인하기 위해 마우스흑색종세포인 B16F10과 인체유래섬유아세포인CCD-986sk를 활용하는 시험이다.
직접 인체에 혹은 동물에 하는 방법이 있으나 이 시험법을 활용할 경우 동물시험을 대체하고 비용을 절감할수 있다.
식약처 가이드라인에 맞춰 세포독성시험과 함께 미백, 항주름, 항노화와 같은 기능성을 평가하여 안전성과 기능성을 검증할 수 있다.
한국분석시험연구원은 기능성 화장품의 유효성평가를 위한 식품의약품안전처 가이드라인에서 제시하는 방법론에 따라,
-미백시험 Melanin synthesis inhibition assay,
-항주름시험, 항노화시험 Collagenase inhibition assay, Type 1 collagen synthesis assay가 있다.
Test method - 미백시험
Melanin synthesis inhibition assay
– in vitro 상에서 세포 배양시 세포 내의 멜라닌(Melanin) 생성 양을 공시료액과 비교하여 시료의 멜라닌 생성 저해 정도를 확인하는 시험법.
– 멜라닌 생성세포인 B16F10에 시료를 처리하여 생성된 멜라닌 양을 비교함.
– 시료의 유무에 따른 멜라닌 생성 능력을 파악할 수 있음.
– 결과(단위) : Melanin contents (%)
시료 타입: 액상 및 파우더
소요기간: 6주
Test method - 항주름시험, 항노화시험
피부 섬유아세포인 CCD-986sk에 시료를 처리하여 피부의 탄력과 관련된 효소(gelatinase, collagenase, matrix metalloproteinase)와 Type 1 collagen 유전자 발현 정도 측정.
해당시험은 Thermo의 real-time PCR 장비를 사용하여 수행.
Collagenase inhibition assay
– in vitro 상에서 real-time RT-qPCR 을 이용해 콜라겐을 분해하는 주름유발인자(MMP-1, MMP-2, MMP-3=콜라겐 분해)의 발현량을 공시료액과 비교하여 주름유발인자의 억제 정도를 확인하는 시험법.
– 결과(단위) : MMPs expression rate
Type 1 collagen synthesis assay
– in vitro 상에서 real-time RT-qPCR 을 이용해 공시료액과 비교하여 노화로 인해 진피층 세포외기질에서 많이 감소하는 type 1 collagen의 증가된 합성 정도를 측정하는 시험법.
-결과(단위): Type 1 collagen synthesis rate
시료 타입: 액상 및 파우더
소요기간: 10주
